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蜡样芽胞杆菌检测课件_图文

蜡样芽胞杆菌检测 Examination of Bacillus cereus 1 蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus) ? 是芽胞杆菌属(Bacillus)的一种,属于土壤细菌 。 ? 在自然界广泛分布于尘土、污水、河流和食品中,在蔬 菜、谷类等农作物和食品原料中主要以芽胞状态存在。 ? 已从多种食品中分离出该菌。涉及的食品有米、肉、乳 制品、蔬菜、鱼、糊、调味汁、布丁、汤、糕点、沙拉 等。在食品混合物如酱油、布丁、汤、红烧蔬菜炖肉中 也发现该菌。 ? 1950年首次在挪威明确报告其致病作用。 2 蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒 ? 蜡样芽胞杆菌食物中毒以夏季(6 ~ 10月)最 高。 ? 引起中毒的食品往往由于食前保存温度不当, 放置时间较长或食品加热不彻底而导致中毒。 3 蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒 ? 该菌引起的食物中毒发病率较高 ? 有可能在可疑食品中找不到蜡样芽胞杆菌 ? 一般认为该菌为条件致病菌,中毒是产生肠毒 素所致 ? 进食其中污染菌量>105/g的食物时,就可能 发生食物中毒。 4 引起食物中毒的原因-肠毒素 ? 呕吐毒素:一种环形,小分子量、热稳定多 肽,100℃30min不能被破坏,为引起呕吐型中 毒的致病因素,常在米饭中形成。 ? 腹泻毒素:一种大分子量蛋白,水样腹泻、 腹部痉挛和疼痛,呕吐很少见。能在各种食物 中形成; 5 引起食物中毒的主要食物种类 ? 美国 炒米饭 ? 欧洲 甜点、肉饼、色拉、奶和肉制品 ? 中国 米饭、淀粉类制品 6 ? 在国内,于1973年首次报告了南京某托儿所 儿童因进食泡饭引起呕吐型蜡样芽胞杆菌食物 中毒后,至今除西藏外,每个省、自治区、直 辖市已经都有报,有些地区甚至占细菌性食物 中毒的首位。 7 临床表现 ? “呕吐型”:潜伏期为0.5h~5h,是由于人摄 入本菌在食品中产生的毒素引起的,原因食品 主要为米饭类、面类(挂面、荞麦面饼)等。 症状以恶心、呕吐为主,病程不超过24h。 ? “腹泻型”:潜伏期为8h~16h,是由于本菌 在肠道内增殖过程中产生肠毒素引起的,原因 食品主要为肉类、肉汤和其它食物。症状为水 泻、腹痛、腹痉挛为主,病程约24h。 8 芽胞杆菌属 ? 70个种,临床上可以分离到的有一下种类: 9 10 蜡样芽胞杆菌分类为芽胞杆菌属的第I群。 11 蜡样芽胞杆菌生物学特性 革兰氏阳性大杆菌, 需氧或兼性需氧 芽胞位于菌体的中心或次末端,不突出菌体 菌体两端较平整,多呈链状排列 生长温度25-37℃,最佳30-35℃ 12 ? 在营养肉汤中32℃培养3d后,芽胞形成 率在90%以上,80℃-85 ℃水浴5min10min可刺激芽胞萌发。 13 新国标编制说明 背景 现行标准不足处 重新修订的意义 14 新国标编制说明 ? 为了在食品中有效开展蜡样芽胞杆菌检测,以 保障食品安全,降低蜡样芽胞杆菌感染的风险, 防止食源性蜡样芽胞杆菌疾病的发生,我国在 1984年制定了《食品卫生微生物学检验 蜡样芽 胞杆菌检验》(GB/T 4789.14-1988)标准,该 标准的颁布为蜡样芽胞杆菌的规范检测,为蜡 样芽胞杆菌病的监测、预防、控制起到了重要 的作用。 15 背景 ? 在以后的二十年时间里,食品中蜡样芽胞杆 菌检测标准经过1994年、2003年二次修订,但 内容可以说完全与1984年版相同。 16 现行GB/T 4789.14-2003标准不足处 ? 1. 对蜡样芽胞杆菌含量少于1000cfu/g的样品计 数效果差。 ? 2.采用的36℃±1℃培养温度并非是蜡样芽胞杆 菌最适生长条件。 ? 3.检验结果与现行的其它国家的标准存在一定 差异。 17 提高检 出率 适用性 和可操 作性 重新修 订的意 义 扩大检 测范围 与国际 接轨 18 提高检出率 ? 蜡样芽胞杆菌的最佳生长温度为30~32℃。 ? 经标准修订协作组验证: ? 30 ℃±1 ℃ 培养48h,平均生长率93.69%。 ? 30 ℃±1℃ 培养24 h,平均生长率92.28%。 ? 36 ℃±1 ℃ 培养24 h。平均生长率82.32%。 19 提高检出率 ? 经统计学分析,30 ℃±1 ℃培养温度的 生长率显著高于36 ℃±1 ℃ (P﹤0.05), 但在培养温度相同的情况下,培育时间 24h和48h蜡样芽胞杆菌生长率无显著差 异(P﹥0.05)。 20 表1 MYP培养条件选择结果 比对单位 吉林省CDC 湖北省CDC 江苏省CDC 菌量 (cfu / 皿) 86 40 67 30 ℃±1℃ 24h 计数结果 生长率 cfu /皿 (%) 88 102.33 48 120.00 25 37.31 MYP平板计数结果 30 ℃±1℃ 48h 36 ℃±1℃ 24h 计数结果 cfu /皿 生长率 (%) 计数结 果cfu / 皿 生长率 (%) 88 102.33 64 74.42 48 120.00 45 112.5 0 26 38.81 50 74.63 36 ℃±1℃ 48h 计数结 果cfu / 皿 生长率 (%) 64 74.42 45 112.5 0 50 74.63 浙江省CDC1 70 73 104.28 73 104.28 64 91.43 64 91.43 广东微生物研 究所 59 81 137.29 88 149.15 61 103.3 8 71 120.3 4 浙江省CDC2 91 65 71.42 59 64.84 59 64.84 50 54.95 浙江省CDC3 34 37 108.82 37 108.82 25 73.53 25 73.53 平均值 63.86 59.57 92.28 59.86 93.69 52.57 82.32 52.71 2182

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